作者datro (事在人为,非环境为)
看板Biotech
标题[问题] Liposome 跟 电穿孔送质体至哺乳动物细胞的效率
时间Tue Sep 12 00:29:45 2006
今天meeting的时候,
跟老板谈到这liposome跟eletroporesis两种方法的效率问题
在in vitro的情况对於贴附细胞的处理。
老板说他听到的是电的效率好,但是因为机器本身的购置成本贵,
所以大家普遍采用Liposome来送plasmid。
但是我看到的文献跟同学间互相打听的情况,
Liposome的效率反而多在50%以上,甚至有到80~90%。
而且细胞毒性的问题在某些厂商的DM上也说了有效的降低。
同学们的实验室也普遍用Liposome在送plasmid。
而从X Cell的操作手册上回去找referenece,
看到的效率并未如liposome一样好。
虽然在细胞膜上打洞使萤光微粒进入细胞的效率也不低,
但是plasmid gene的表现量却..........cuvette的价钱也.......50个/8.7k....
其他实验室的学姊电HL-60的效率也在两三成上下。
我们实验室两者都还没做过,都想要尝试看看(事关我的毕业...已经延了XD)
想请教版上的各位先进几个问题,
对於表现plsmid的效率,在各位的操作经验里究竟哪一种方法效果比较好?
我是比较偏爱Liposome啦!因为我觉得电的效果跟对细胞的伤害实在是.......
这样又有另外的问题了,与liposome相比电穿孔法的又有何优点?
我有找到一些资料但是可能还是不够完备。
对於一些特殊的细胞或是linear plasmid的效率比较高,
如:dendritic cell / Embryonic Stem Cell
是否电的比较容易发生homologous recombination? 所以比较容易形成Stable clone?
in vivo的情况,电也会促使plasmid表现,增加DNA vaccine的活性。(近期都偏重这里)
除此之外,电穿孔法还有其他优点吗?
以上疑问还恳请版上各位先进能帮忙解答,谢谢。
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◆ From: 218.171.153.47
1F:推 ROKEE:gene pluser不过30万,算值得 cuvette一支才200,还可以reuse 09/12 00:34
2F:推 aggaci:因细胞而异,electroporation大多用於悬浮性细胞 09/12 01:13
3F:推 datro:听到也是这样 不过我偏偏要挑战没内建的贴的 (抖) 09/12 01:17