作者aggaci (挖拍狼欧！！)
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标题Re: [问题] Liposome 跟 电穿孔送质体至哺乳动物细 …
时间Tue Sep 12 23:16:25 2006
※ 引述《llorraine (心中的少年韩波)》之铭言：
: 我学姊两种方法都用过 目前偏好使用liposome
: 不只效率高 操作过程也方便快速
: 电击法对细胞的伤害性很大 通常做完会损失一半的细胞
: 且步骤比较繁复 需要的细胞量也比较多(因要克服死亡率)
: 以上经验主要来自HEK293与常见的liver cell line
liver cell?HepG2吗
请问你用什麽方法transfection?
谢噜
: ※ 引述《datro (事在人为，非环境为)》之铭言：
: : 今天meeting的时候，
: : 跟老板谈到这liposome跟eletroporesis两种方法的效率问题
: : 在in vitro的情况对於贴附细胞的处理。
: : 老板说他听到的是电的效率好，但是因为机器本身的购置成本贵，
: : 所以大家普遍采用Liposome来送plasmid。
: : 但是我看到的文献跟同学间互相打听的情况，
: : Liposome的效率反而多在50%以上，甚至有到80~90%。
: : 而且细胞毒性的问题在某些厂商的DM上也说了有效的降低。
: : 同学们的实验室也普遍用Liposome在送plasmid。
: : 而从X Cell的操作手册上回去找referenece，
: : 看到的效率并未如liposome一样好。
: : 虽然在细胞膜上打洞使萤光微粒进入细胞的效率也不低，
: : 但是plasmid gene的表现量却..........cuvette的价钱也.......50个/8.7k....
: : 其他实验室的学姊电HL-60的效率也在两三成上下。
: : 我们实验室两者都还没做过，都想要尝试看看(事关我的毕业...已经延了XD)
: : 想请教版上的各位先进几个问题，
: : 对於表现plsmid的效率，在各位的操作经验里究竟哪一种方法效果比较好？
: : 我是比较偏爱Liposome啦！因为我觉得电的效果跟对细胞的伤害实在是.......
: : 这样又有另外的问题了，与liposome相比电穿孔法的又有何优点？
: : 我有找到一些资料但是可能还是不够完备。
: : 对於一些特殊的细胞或是linear plasmid的效率比较高，
: : 如：dendritic cell / Embryonic Stem Cell
: : 是否电的比较容易发生homologous recombination? 所以比较容易形成Stable clone?
: : in vivo的情况，电也会促使plasmid表现，增加DNA vaccine的活性。(近期都偏重这里)
: : 除此之外，电穿孔法还有其他优点吗？
: : 以上疑问还恳请版上各位先进能帮忙解答，谢谢。
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◆ From: 140.114.100.165
1F：推 llorraine:就是liposome啊... 09/13 13:41
2F：→ jbking:可以考虑用amexa的系统电进核里 09/17 09:09