※ 引述《leondemon (狗狗)》之铭言： : 我是第一次跑SDS-PAGE : 跑PAGE的药剂几乎都是买新的~ : 药品状态如下: : Running Buffer:放了一年的10倍stock(已开封)，跑胶前稀释配置完毕。 : Acry/Bis:放了一年，未开封，一直躺在4度冰箱 : APS:新买药粉，配了1CC，冰在-20冰箱 我以前这样用,用一年以上还ok : TEMED:新买药剂，平时放在阴暗处，瓶子为褐色避光材质。 : SDS:新买药粉，配了10%放在室温 : Tris:新买药粉，配了1.5M(pH=8.8)和0.5M(pH=6.8)放在4度冰箱 buffer可以放在室温 : marker:新买，波士顿的protein marker，middle range，Cat NO:PT-PM01 : 目前问题: : 1.我的marker完全没有分层，可是我有放别人的marker，可以看到不同颜色的Band : 是不是我的marker有问题，还是我买错了?(什麽是prestained marker) 你的marker和别人家的是同一种的吗?完全没分层是因为没跑开吗?? 新买的应该不会有问题 : 2.第一次制胶时，感觉胶体作的不是很好，虽然胶片有凝结，但是tube内的没有 : 後来跟别人借Acry/Bis来重新配，也用自己的Acry/Bis配一管，两管都有凝在Tube : 但是感觉我的凝胶表面不是水平状，但是别人的Acry/Bis配的，表面很平 在tube内不平也蛮正常的,load在玻璃片之後用水或2-propanol有压平就好了 TEMED可以偷偷加多一点会凝的比较快... : 3.在stacking时，每条lane的dye都会越来越胖， : 随着时间流逝，别人家的marker，band呈梯形状，这样正常吗? 是loading buffer的关系吗?每个well的loading buffer的量 最好一样跑起来会比较好看(每个well都有load的话跑起来也会比较平) : 4.APS粉末能否放在室温?? : 药剂/药品在配置上和保存上有哪些要注意的?? 我们粉末的就放在室温...但其实APS应该都要fresh的比较好 但我们冰在-20度居然可以用个两三年.... : 麻烦各位前辈帮忙了~ 这是我的个人经验啦!!! --

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