作者leondemon (狗狗)
看板Biotech
标题Re: [问题] SDS-PAGE跑胶 很多问
时间Sat Sep 16 21:19:30 2006
感谢各位前辈的回答
下面是我的状况在详述~
※ 引述《leondemon (狗狗)》之铭言:
: 目前问题:
: 1.我的marker完全没有分层,可是我有放别人的marker,可以看到不同颜色的Band
: 是不是我的marker有问题,还是我买错了?(什麽是prestained marker)
看来我的marker应该不是pre-stained的
要找sales换了
: 2.第一次制胶时,感觉胶体作的不是很好,虽然胶片有凝结,但是tube内的没有
: 後来跟别人借Acry/Bis来重新配,也用自己的Acry/Bis配一管,两管都有凝在Tube
: 但是感觉我的凝胶表面不是水平状,但是别人的Acry/Bis配的,表面很平
我是泡两管在tube内,然後静静的站在架子上~
结果用别人acry/bis泡的 比较快凝 而且表面是平整的
我的acry/bis泡的 稍慢一点点 而且表面有点像 搅拌过的布丁 凹凸不平(只有表面喔~)
另外~跑0.75mm厚的胶
APS和TEMED的量 怎麽样比较合适呢??
: 3.在stacking时,每条lane的dye都会越来越胖,
: 随着时间流逝,别人家的marker,band呈梯形状,这样正常吗?
就是我用别人家的pre-stained marker,他的ladder跑越远越宽,感觉都到隔壁家去了
要注意哪些事情 才能让PAGE跑的漂亮呢??
另外,似乎有染剂可以先染membrane(我是用PVDF)看结果,然後再後续的抗体反应
有没有关於预染这方面的做法和相关要注意的事项呢?
还是感谢各位先进的解答了~
※ 编辑: leondemon 来自: 61.229.161.23 (09/17 03:01)