作者sesamestreet (我要ののたん)
看板Biotech
标题[问题] 请问real time PCR的问题 (新手>.<)
时间Wed Sep 20 22:40:30 2006
请问我在做first strand cDNA 用来当real time PCR的template
我是取 5μg 的RNA
而依造protocol是要用 "200 U" 的 Reverse transcriptase来做
但是我用的是每 λ "10 U"的 AMV Reverse transcriptase 只取 1λ
最後总体积会变成20λ
之後我再把总体积补到 100λ
会变成5μg / 100λ 浓度的 cDNA 吗????
因为我用的是只有10 U 的enzyme
而Real time PCR的template (cDNA) 是50 ng
我怕因为enzyme活性的不同会影响cDNA的量
不好意思
写的很乱 >.<
希望有人看的懂 >.<
谢谢喔
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