作者ssuny (Cheer up!!!)
看板Biotech
标题[问题]PCR批不出东西
时间Sat Sep 23 23:08:45 2006
身为一个研究生...有些实验做不出来也是很合理的...冏
这阵子开始在clone一个gene
是以cDNA当作template去做PCR
一开始测condition时p了两三次都有p到我要的片段
但是我开始要做clone时同样的condition却p不出来了...冏rz
annealing温度降了10度多还是p不到band...不然就是band弱到几乎没有
目前已测试过cDNA,taq buffer, primer, dNTP, taq都没问题..
这是卡到阴吗...(/‵Д′)/~ ╧╧
有版友发生过类似的情形吗?? 是如何解决的呢?
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还是连primer stock都坏了? 应该没这麽衰吧....
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http://www.wretch.cc/album/album.php?id=suny&book=4
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◆ From: 211.72.204.94
1F:推 chiehgriffin:如何知道primer没有问题? 09/24 00:59
2F:推 ssuny:我有重新从stock稀释..跟之前曾p出来过的测试过 09/24 11:21
3F:→ ssuny:而且primer stock是这一个月才定的...现在就坏有点离谱 09/24 11:22
4F:推 llorraine:机器坏了? 我有遇过这种的....orz 09/24 21:20
5F:推 SUESHIN:有没有想过水的问题.... 09/25 01:31
6F:推 chory:建议 做nested试看看 09/27 20:24