看板Biotech
标 题Re: [问题] 有关western blotting的问题
发信站不良牛牧场 (Wed Sep 27 12:54:13 2006)
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※ 引述《[email protected] (jolly)》之铭言:
: 在下最近进行westerm的实验
: 想要看的蛋白是cytochrome c (15kDA)
: 算是小分子的物质
: 因此就制作15% GEL进行实验
: 可是最後压片出来的Band很粗 不是细细的一条
: 而将同样15%gel去看 actin(43kDA)结果的BAND 就是细的一条
: 撇除cytochrome c量表现很多 因为跑12.5% Gel时 band就不会很粗
: 请问各位也有这样情况吗 或是这是要怎麽解释啊
: 感恩
这跟gel的%有关系 当跑15%的时候 小分子区域的位置就会被拉开
因此就会造成Band 很粗
而大分子区域没办法将距离拉这麽大
所以会被压缩成一条细细的band
不过我比较想问W大 transfer的condition
因为我最近也要压小分子蛋白 但是压不出来
可以请问一下 transfer buffer的配方 跟transfer时的condition 吗
谢谢^^
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1F:推 transmore:理论上..%越高..应该可以把band压的越紧密不是吗? 09/27 21:41