作者ctlee (宁静小城)
看板Biotech
标题[问题] 有人用过Hygromycin来选择transfectant吗?
时间Thu Sep 28 10:21:21 2006
请问有人用过Hygromycin B来选择NIH 3T3或其他老鼠的细胞吗?
这个抗生素对细胞的毒性好像比G418还要强很多
我在做transfection之前已经做了kill curve
用未transfect的细胞在12-well dish试了12个不同的hygromycin B浓度
找出能让在五到七天内能让>90%细胞死亡的最低浓度
大约是75 ug/mL
然後我将construct电冲进细胞,让细胞在antibiotics-free medium养两天後
开始selection,我也在大约在四到五天後看到massive cell death,
今天是第七天,我是有看到有活着的细胞,
但是size变小, 形状看起来也不是很健康
我很担心这些细胞到最後也会死掉,然後我什麽clone都挑不到
所以请有经验的专家帮忙了,感激不尽
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◆ From: 128.138.41.199
1F：推 starcindy:我们是用50ug/ml for PC12(大鼠嗜铬细胞) 09/28 10:44