作者trustnol (trustnol)
看板Biotech
标题Re: 请问有人利用这种方式进行western blot的抗体ꐠ…
时间Thu Oct 5 23:37:36 2006
※ 引述《Mouseking (叫我老鼠王....-_-)》之铭言:
: ※ 引述《ginmol (储备博士)》之铭言:
: : 老板坚持我不可以用到"毫升"等级去稀释我的一级抗体,
: : 因此"建议"利用果酱涂抹的方式,用最少体积的抗体接触PVDF membrane,
: : 只要避免membrane乾掉就可以....
: : 虽然目前我已经用夹链袋的方法去做抗体抗原反应(整片10个lane体积不高於4 mL),
: : 但还是难以说服他....请大家不吝叙述自己的意见吧....感激!!
: 好的抗体真的不是用钱可以衡量.....
: 如果你曾经为了找好抗体伤过脑筋....
: 如果你知道这抗体得制作过程要花费多少人的心血....
: 多少只可怜的动物....或多少盘数不清的细胞...
: 你会懂得你老板的用意.....
: 当然我也知道稀释量越多,背景越乾净...越方便操作
: 何不把当作自己的技术磨的更好的机会勒....
: 如果别人要4ml可以作成,而你只要1.5ml...
: 你不觉得很爽嘛?
: 我觉mini gel用2ml就可以了
: 如果实验排够紧,还建议你回收使用勒
大家都用这麽少喔~~
那我们家会不会太浪费呢
我是用那种小的微波保鲜盒做的
所以用10ml说~~~0rz
然後五百倍dilute 加入20ul 一抗
我的membrane 大小是大约6X8cm
我想知道4ml是怎麽用的啊??
因为後来我才发现一小小的瓶才100ul
这样五次不就没了 好像要一万三说
我想知道4ml是怎麽弄成的啊??
还是说你的membrane比较小呢??
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 61.229.2.14
1F:→ ginmol:您家实在太有钱了...我的membrane也是6X8... 10/06 22:18
2F:推 orangel:500倍稀释@@.......厉害!! 10/09 11:09
3F:推 s850284:我们家也是五百倍稀释,也是差不多七到十毫升@@ 02/24 00:29