作者moonyusagi (获得舍得懂得记得)
看板Biotech
标题Re: 请问有人利用这种方式进行western blot的抗体ꐠ…
时间Thu Oct 5 23:54:17 2006
※ 引述《trustnol (trustnol)》之铭言:
: ※ 引述《Mouseking (叫我老鼠王....-_-)》之铭言:
: : 好的抗体真的不是用钱可以衡量.....
: : 如果你曾经为了找好抗体伤过脑筋....
: : 如果你知道这抗体得制作过程要花费多少人的心血....
: : 多少只可怜的动物....或多少盘数不清的细胞...
: : 你会懂得你老板的用意.....
: : 当然我也知道稀释量越多,背景越乾净...越方便操作
: : 何不把当作自己的技术磨的更好的机会勒....
: : 如果别人要4ml可以作成,而你只要1.5ml...
: : 你不觉得很爽嘛?
: : 我觉mini gel用2ml就可以了
: : 如果实验排够紧,还建议你回收使用勒
: 大家都用这麽少喔~~
: 那我们家会不会太浪费呢
: 我是用那种小的微波保鲜盒做的
: 所以用10ml说~~~0rz
: 然後五百倍dilute 加入20ul 一抗
: 我的membrane 大小是大约6X8cm
: 我想知道4ml是怎麽用的啊??
: 因为後来我才发现一小小的瓶才100ul
: 这样五次不就没了 好像要一万三说
: 我想知道4ml是怎麽弄成的啊??
: 还是说你的membrane比较小呢??
哇~~~20 ul超伤的耶!!!
我们实验室有一种对付超贵稀释倍率又超低的抗体的方法
给大家参考看看,我做的结果是都还蛮好的
我们是将membrane(10 lane)放在上面贴有parafilm的玻璃片上
加入抗体(500~1000 ul)
最後在上面压上一层投影片那种透明胶片(像是盖玻片一样,小心不能有气泡)
最後一整个放入保鲜盒中,4度c冰箱,O/N
这方法还蛮省的,可以试试看
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◆ From: 140.122.152.33
1F:推 trustnol:那不用「摇」吗? 10/05 23:59
2F:推 havenn:用封口袋 hybrydization bag 16x10 的membrane 3ml就很够了 10/06 00:12
3F:推 moonyusagi:不用摇.... 10/10 00:16