※ 引述《silverberry (告诉我...没有的答案...)》之铭言： : 前阵子我们实验室和国外的实验室取得合作的机会 : 这几天终於收到对方寄给我们的"滤纸片" : 欢天喜地的用 TE buffer 把 plasmid 回溶出来以後 : 备份到 DH5a 中後发现 : 我们实验室没有可以 overexpression 的那一株 E.coli BL21-AI : 後来刚好有同学也是用这个 vector : 可是因为他们实验室也是跟别人拿 stock 的菌 : 所以他们的菌里面已经有 vector 了 也不适合我们 transfomation : 一般都是说如果在缺少抗生素 (select marker)的情况下 : 菌很容易会把 vector 丢出来 : 不过经过两个礼拜的奋斗 目前还是筛不出丢掉质体的 BL21-AI : 不知道版上的各位有没有人实验室有在使用这一株菌 : 是否能分给我们 : 我查过厂商的网页 关於这部份的菌株在无关商业利益时可以自由交换 : 所以不会触法 : 或是有没有前辈们可以指点我用什麽方法 : 能让菌把 vector 吐出来 : 谢谢^^ 实验室中的学长是在broth当中添加Novobiocin这种药物 最终浓度为32 micro g/ml 培养96小时候涂抹在plate上 重复几次步骤後筛选出无质体的菌株 但是他是做乳酸菌的..... --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.107.131