作者anidiot (^__________^)
看板Biotech
标题Re: 请问RT-PCR
时间Wed Oct 25 12:55:35 2006
※ 引述《elgase (夏生桂和)》之铭言:
: ※ 引述《anidiot (^__________^)》之铭言:
: : 请问RNA转成cDNA後
: : 我想要做semi-qPCR
: : PCR产物不saturate为前提
: : 25个cycles跑gel看的到吗
: : (target gene:理论上高表现量; internal control:beta-actin)
: : 疑惑中~
: 要做semi-qPCR事前要先check很多细节,如果能上real-time PCR会比较单纯一点
老师是希望在上机之前
若能跑gel看到差异还有调好condition再去做real time
不过我今天跑了可以看到band
接下来应该就会去做real time
谢谢大家的意见 ^^
: 我以前的经验是,如果你RT用的total RNA总量有1ug,actin大概在23个cycle就
: 可以在胶上看到band,至於interesting gene的band,那就case by case,要看它本
: 身在tissue内的表现量.
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