作者Mouseking (叫我老鼠王....-_-)
看板Biotech
标题Re: [问题]请问各位有关於PCR再现性问题
时间Fri Oct 27 03:07:44 2006
※ 引述《piggylo (piggy)》之铭言：
: 目前我做的PCR或RT-PCR都会面临到再现性不好的问题
: 例如有些sample第一次跑是会有产物的，可是之後再多跑几次又会不见了
: 为了排除是否因为DNA或cDNA品质不好，
: 我有检查过DNA的ratio以及cDNA的GAPDH表现
: 结果都是OK的，可是往往在做PCR或RT-PCR时，就会出现反反覆覆不同的结果
: 让我很困扰，因为自己无法解决也没办法向老师报告实验结果
: 因此希望在这里可以请教各位看看是否是哪边有问题，谢谢。
你PCR的template是 genomic DNA？
考虑RT是否没问题？你用OligodT还是random Heximer?
cDNA的保存方式?通常放越久越不好
考虑添加物如DMSO或Betaine.....
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