※ 引述《chiehgriffin (...)》之铭言： : ※ 引述《lovepig414 (pig)》之铭言： : : 各位大大 : : 小弟以本实验室的细胞株做了RT-PCR後，之後再做clone完後，送生技公司做定序， : : 定序完成後，上了NCBI做序列比对，发现自己做的定序和资料库上的定序相似 : : 度高达98%，我想应该是很高吧，所以推测此细胞应该是有此基因，然而，我的 : : 老板却问我了一个问题，就是为什麽相似度不是100%?要我做回覆！ : : 我自己想的结论是： : : 1.也许是机器的问题，本身就有错误率！(但是机器做出错误的 : : 机率是很低的！) : : 2.也许是基因上本身就有一点不一样，但是转译出的protein : : ，可能会是相同的！(这个可以做胺基酸比对得知。) : : 再来我就不太知道为什麽了，自己也上网站找寻了一下，但是真的找不太到相 : : 关的资料，不知道板上的大大们，有没有人可以帮帮我啊！再过几天就要meeting， : : 可是我却如此的不知所以然，救救我吧！ 感恩阿！ : 可以去看看定序序列的raw data，也就是peak，通常定序的长度差不多都在1Kb或是 : 少於，而且刚开始或是最後序列无法判定的情形是常见的，建议您亲自看看peak : profile。 : 另外可能您的基因有mutation也说不定阿！ : 参考一下... 好奇问一下....你有拿掉原先vector上multiple cloning site到使用primer之间的 序列嘛？我上次是忘记拿掉所以没有100％......如果有....我想是机器问题多一点 --

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