会产生问题的地方太多了 你把基因弄出来後已经PCR一次 clone完後定序时又PCR一次~~ 每次PCR中其实又复制了好多次 当然这都是我们没办法控制的 先不管这个 要增加准确度我们可以控制的在於 1. 序列多读几次，起码从头和尾各一次，当然这还是不够 2. 送序的序列最好为基因的全长序列 3. 从不同的strain中clone这个基因送序 大概是这样 ※ 引述《lovepig414 (pig)》之铭言： : 各位大大 : 小弟以本实验室的细胞株做了RT-PCR後，之後再做clone完後，送生技公司做定序， : 定序完成後，上了NCBI做序列比对，发现自己做的定序和资料库上的定序相似 : 度高达98%，我想应该是很高吧，所以推测此细胞应该是有此基因，然而，我的 : 老板却问我了一个问题，就是为什麽相似度不是100%?要我做回覆！ : 我自己想的结论是： : 1.也许是机器的问题，本身就有错误率！(但是机器做出错误的 : 机率是很低的！) : 2.也许是基因上本身就有一点不一样，但是转译出的protein : ，可能会是相同的！(这个可以做胺基酸比对得知。) : 再来我就不太知道为什麽了，自己也上网站找寻了一下，但是真的找不太到相 : 关的资料，不知道板上的大大们，有没有人可以帮帮我啊！再过几天就要meeting， : 可是我却如此的不知所以然，救救我吧！ 感恩阿！ --

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