作者jay0404 (yuga)
看板Biotech
标题[求救] 有关gel extraction
时间Mon Nov 20 10:34:09 2006
小弟目前再做一个subclone
所以要把目前clone的plasmid中的insert用限制酉每处理
在用gel extraction kit把它elute出来
我首先使用EcoRI去切分离出两个片段
vector(3k)+insert(~900bp)
在用BsaHI去处理第二刀Vector变两个片段(~1200+~1800)
insert变成(~750bp+~150bp)两个片段
而我要的事~750bp的片段
跑胶後很高兴的把它切下来
用Qiagen gel extraction kit去elute
但是........
elute完的DNA去跑胶定量加check後
冏rz.....
它的片段跑到1000bp多了
做了好几次都这样
於是我不死心的把elute完的DNA去做限制酉每处理
用了EcoRI BsaHI EcoRI+BsaHI 三种切法
跑胶後发现都掉回我原本要的大小~750bp
跟老师和学长讨论的结果是说他们做这麽久从没发生过这种事情
请问有人有遇过吗??或是有解决的方法吗??
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 218.170.23.189