: 第一个问题....你的percentage为何可以差这麽多7% v.s 12%? : 还有transfer 的电流？如果gel大小一样为何要减半？ 第一次都用12%胶来跑 然後看到自己要看的分子感觉被挤在上面 加上下方的background多 所以考虑用低浓度的跑~ 第一次 我是跑两个胶 第二次只跑一个 所以电流就减半罗~ : 二抗太高只会压海苔....你的没signal band不必考虑降低二抗！ 嗯嗯 : : TBST VS PBST : 这个问题有深度.....当初也困扰我很久...... : 我问过很多做Western好的lab同学....其实他们也不知道 : 怎回答这问题...TBST tris-base saline buffer加 tween 20 : 而PBST是phosphate-base buffer saline加 triton x-100 : 我当年是搞不清楚tween 20 和Triton X-100有何不同？ : 经过这几年....我的结论是....黑猫花猫白猫....会抓老鼠就是好猫 : 一个大原则是做磷酸化抗体别用PBST....其他都是实徵理由... : 如果有错希望高手指导....所以建议你自己做个实验PBST TBST : side by side跑一次.....证实看看是不是PBST才行？ 呵呵 後来发现TBST也可以 是公用二抗坏掉了 谢谢你哩 --

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