可以试试看 google : plasmid heat-shock competent cells transformation trouble-shooting problems 这些 key word 的组合。 就会找到很多解答了。 另外heat shock cells制作方式在Molecular cloning等书上面都有。 作法有很多种，但是都大同小异，选一个喜欢的吧。 因为你的资料讲得不是很详细， 所以我只能猜猜看你犯了什麽错误步骤。 看看有没有猜对。 因为 heat shock cells 对温度的转变很敏感， 如果是平常存在 -80 C，要用的时候不是要稍微解冻一下吗？ 但是如果那个tube里面的cell没有一次用完， 下次要用往往就会不能用了。 因为经不起这样解冻又冷冻解冻又冷冻的过程。 所以最好是在一开始制作的时候就分装成小管， 每管刚好用一次。 这是heat shock比较容易出问题的地方。 加油！ ※ 引述《ninelives (加油!!)》之铭言： : 请问transformation 如果菌太多的话 : 涂盘 有没有可能看起来像是什麽东西都长? : XL-1 blue若想要用heat shock去做transformation : 需要做什麽前处里 例如:用CaCl2? : 之前做transformation 都长很多 : 结果有一次就突然都没看到colonies : 希望各位大大可以提供些意见 谢谢^^ --

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