作者lentivirus ()
看板Biotech
标题[问题] 有关protein expression vector (pET series)
时间Tue Dec 5 00:49:00 2006
大家好...
最近在做cloning的时候不是很顺...
vector：pET-21b
好不容易ligation-transformation後长出colony
但是摇5ml菌液抽plasmid结果确是空的...
不知道大家有没有类似的经验....
有可能是大部分的能量都拿去做蛋白了...质体复制的少...
不过我有去测浓度...每ul还有20ng...这就蛮怪的...
想请教大家..在做这些蛋白表现的construction有什麽要特别注意的...
谢谢大家罗 ^_^
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◆ From: 59.115.150.180
1F：推 kitiara:pET system是需要 IPTG induce才会生产 Protein 12/05 13:34
2F：→ kitiara:你抽不出来应该跟作蛋白无关 12/05 13:35
3F：→ elgase:你transform完有先跑colony PCR吗? 12/05 19:58
4F：→ elgase:如果没有,建议你用sepcpfic primer跑PCR确认有没有insert 12/05 20:00