※ 引述《lentivirus ()》之铭言： : 大家好... : 最近在做cloning的时候不是很顺... : vector：pET-21b : 好不容易ligation-transformation後长出colony : 但是摇5ml菌液抽plasmid结果确是空的... : 不知道大家有没有类似的经验.... : 有可能是大部分的能量都拿去做蛋白了...质体复制的少... : 不过我有去测浓度...每ul还有20ng...这就蛮怪的... : 想请教大家..在做这些蛋白表现的construction有什麽要特别注意的... : 谢谢大家罗 ^_^ 可能长出来的colony都是杂菌吧.... 抗生素浓度不够或是培养时间过长,都会让你的plate上长出杂菌 建议你可以准备两个plate,一个涂没有transform的comp. cell 另一个才是涂有transform的菌,这样比较能知道所长出来的是不是杂菌 至於你说的测浓度有DNA...有可能是你抽DNA的时候contaminant到细菌的 genomic DNA. --

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