有人用过从血液中抽出的cDNA做real-time PCR吗? 因为本身是用ABI的机器run real-time PCR... 但一直try不好PCR的condition... 不然就是有出来後...再做一次就没出来了... 且Ct值一值都满後面的...40上下... 所以一直做到没信心...>< 所以我想请问各位real-time PCR几个问题..以解笨小弟我的疑惑.. 1.real-time PCR做的时候,反应的量一定要加的很精准吗??? 2.ABI的real-time PCR是不是都不用设定annealing..这样一定都做的出来喔?? 3.因为我是用kit抽RNA,但是是用一般方法转cDNA..所以会有可能cDNA转的不好吗? 4.请问有人用invitrogen这家的kit抽RNA吗?...做後续效果都可做很漂亮吗?? 5.请高手帮我想一下我该怎麽办...谢谢... --

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