作者aggaci (学钢琴,左手怎麽那麽笨)
看板Biotech
标题Re: [问题] help 有关蛋白质纯化
时间Sat Dec 9 20:46:28 2006
※ 引述《aistella (海风。沙)》之铭言:
: 我已经看过了
: 可是..里面的连结网页
: 对於蛋白质纯化的原理我还不是很懂= =
: 我是用his-tag 标记目标蛋白的
: 加 Ni-NTA下去
: 利用Urea buffer 的pH浓度越来越低分离出protein
: (因为我的protein是inclusion body 的形式表现)
: 不过我根本不知道加Ni-NTA是为什麽
: 不同pH浓度的Urea 又分别是干麻
: 请知道的人帮帮我
: 我很急的想知道><
: 感激不进
Nickle column是利用6H跟nickle亲和力极高所衍生出来的纯化方法
方法有两种
一种是利用不同浓度的imidazole去竞争与nickle的结合能力
另一种是利用不同的ph值来让6H跟nickle的结合能力降低
两种都可以将蛋白质纯化出来!
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