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标 题Re: [问题] help 有关蛋白质纯化
发信站清华生命科学 BBS (Sat Dec 9 21:17:24 2006)
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his-tag 的特性就是会 bind Ni (镍)
NI-NTA 是带有 Ni 的树脂颗粒
把 cell lysate 跟 Ni charged resin incubate 一段时间
（或者是过 column）
his-tagged protein 会黏到上面
wash 以後再用 low pH buffer 来 elute 就可以得到纯化的蛋白质
Urea 是用来 denature 蛋白质的
低 pH 值则可以干扰 his-tag 跟 Ni 的 binding
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莫非定律:
到了期末才会想起期初曾选了一门课却一直没去上
补充定律:
拿到成绩单才发现上了一学期的课忘了去考期末考
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※ Origin: 生命科学 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
◆ From: ppp-70-227-5-184.dsl.bcvloh.ameritech.net
1F：推 mindy27:还有用较低的PH BUFFER 虽然ELUTE效果较好 12/09 22:17
2F：→ mindy27:不过protein却容易degraded,可以用较高pH buffer来平衡 12/09 22:18