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标 题Re: [问题] help 有关蛋白质纯化
发信站清华生命科学 BBS (Sun Dec 10 21:30:08 2006)
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※ 引述《[email protected] ( )》之铭言：
> 嗯，我们的实验室也是差不多的
> 但如果你用8M的URE去溶的话
> 我们是把8M Urea 加入binding buffer
> 然後去破菌
> 离心後收上层液，你可以在这个地方透析
> 再去纯化，跑sds page
> 或是纯化的过程中的buffer都要含8M Urea的去泡
> 纯化後的蛋白wash後用都可以用imidazole去把蛋白elute下来
> 但你都要透析哦
> ps你直接加lysis buffer是想要跑page後，不染色而去切gel来纯化吗
Urea 对 SDS-PAGE应该是没影响
我用的那本手册里面有写
事实上也没有碰到过什麽问题
反而要注意的应该是 buffer 的离子浓度跟 pH
至於lysis buffer 溶完，或者是 elute 下来尚未透析时跑 SDS
我想很正常吧
每一个步骤都留一点东西下来跑 PAGE 这样出问题才有得检查啊
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莫非定律:
到了期末才会想起期初曾选了一门课却一直没去上
补充定律:
拿到成绩单才发现上了一学期的课忘了去考期末考
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※ Origin: 生命科学 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
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