※ 引述《[email protected] (黑点)》之铭言： > 我好像有点被搞混了，能请问一下cDNA amplify的过程 > 中这两种kit的差别在哪？ > 1) First-Strand Synthesis > 2)One-Step RT-PCR System > 是我的误解吗？我会以为这两种系统的差异是在 > 第一个他是针对total RNA来amplify全长的cDNA出来。 > 而第二个系统是针对，特异性的片段来amplify。 > 能否请知道的大大解释一下！！谢谢 就我所知道的回答看看,有错误请指证 我想你应该指的是RT-PCR two steps 跟one step的差异吧? Two steps 基本上跟你说差不多,是针对Total RNA amplify cDNA 所以是使用Oligo-dT当作primer,再利用reverse transcriptase反转录成cDNA amplify出来的是total cDNA,然後再用这cDNA, 以specific primer去PCR amplify所要的片段 One step 只是将reverse transcriptase 和 taq mix在一起的混合 所以直接以specific的primer加入,先以低温作reverse transcription, 再以高温作PCR amplification, 只是一开始就是以specific的primer作cDNA而已 应该差不多是这样吧 -- ◤◥ Origin: 中央生科˙生生不息 nculs.twbbs.org.tw ◣◢ Author: zoarlu 从 140.109.56.171 发表