我染PI出现两个问题, 麻烦请帮我看图中红色的部分, 谢谢 ^^ 这是以前染的fibroblast, 是成功的 http://tinyurl.com/y9jpnb 问题一 相同种类细胞, 但是染到细胞质, 且核部分不明显 http://tinyurl.com/ygtgfb 问题二 不同种细胞(keratinocyte), 为什麽核中有圆圆区域染不到 keratinocyte A: http://tinyurl.com/yc6g5g keratinocyte B: http://tinyurl.com/ycdpt8 是因为不同种类细胞而有的特徵吗? 可是我实在想不出来那应该是细胞核的哪一个细部位置? 有些人说是核仁, 但核仁的颜色应该要比较深(红), 不是吗? 我处理步骤都一样(每个步骤之间都用PBS wash三次): 1. 细胞固定: 2% paraformaldehyde, 15min, RT 2. 打 洞: 0.1% triton X-100, 10min, RT 3. blocking: 1% FBS in PBS 1-2hr, RT 4. 染 一 抗: 这部分没有问题, 暂不讨论 5. 染 二 抗: 同上 6. 染 核 PI: 4ug/mL, 5min, RT 7. 封 片 --

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