作者longy (冲创)
看板Biotech
标题Re: [求救] 抽pasmid的量都好少
时间Fri Dec 15 14:16:14 2006
※ 引述《u8524009 (VIP好人卡....)》之铭言：
帮补充几点
: 1.因为你是用Kit抽plasmid,所使用的column都有可以容纳DNA量的上限,
: 过多的的菌并不会让所抽的DNA变多,反而会让你所加的Solution 1,2,3效果变差
: 最好是依照portocol上所建议的菌液体积来进行实验,
: 若所需要的DNA要很多,可以将摇的菌多分成几管来进行,不要全部混合到一管进行实验.
我的经验是
一个reaction大概可以抽6ml的菌液(最多)
但是我怕效率不好 所以 我每一个reaction都只做3ml
然後一次做六管 这样就18ml了
: 2.最後一步用水回溶的体积可以用100ul,并且注意最後加的时候,是加到column的中间,
: 最後再用真空乾燥浓缩DNA,这样可以增加所抽取出来DNA的量
在回溶之前 可以放在60-80度的水浴上
因为wash buffer都含有酒精
如果酒精残留在membrane上
可能会导致回溶效率不好
有几家KIT的protocol上也有这样的建议
提供你参考
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