作者circleming (新世纪音乐)
看板Biotech
标题[问题] 冷冻包埋
时间Sat Dec 16 04:21:44 2006
最近要做冷冻切片,
但是我很猪头,
将老鼠的spleen切下来後,
就很开心的加OCT用液态氮快速冷冻,
中间漏掉了一步:incubate with 20% sucrose 30min
查了网路资料,
说sucrose为冷冻保护剂...可以减少冰晶产生...
那这样我现在漏掉了这一步~
但仍然是快速冷冻~
会影响组织的morphology很大吗?
其实下礼拜应该就知道结果~
只是想说心里先有个底,
出来的germinal center会长怎样..> <
不知道各位能不能提供些意见...
谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 128.255.122.184
※ 编辑: circleming 来自: 128.255.122.184 (12/16 04:22)
1F:推 ostine:其实没有sucrose,仍然可以做,morphology会比较丑一点是真 12/16 10:51
2F:→ ostine:的,但是我们实验室还是习惯直接丢OCT,因为切片的时候比较 12/16 10:52
3F:→ ostine:切,经过处理再丢OCT的,都比较难切 12/16 10:53
4F:→ ostine:不过不处理直接丢的时候,要小心保存,大概从-80拿出来个 12/16 10:54
5F:→ ostine:3次,那块tissue就差不多不行了,切出来的片子很容易破掉 12/16 10:55
6F:推 circleming:谢谢,我就是注意到切片的时候容易破,才想到.. 12/16 12:12
7F:→ circleming:原来漏掉了这一步...-_-" 12/16 12:12