作者lakerjackt (NN )
看板Biotech
标题Re: [问题] Real-time PCR
时间Sat Dec 16 16:44:00 2006
若是酒精受影响.....有没有办法除了重抽以外...
针对转好的cDNA做补救??
可是我觉得应该不太可能是酒精影响ㄟ...
因为我抽RNA是用kit,不是用trizol....
而我每次加完wash buffer,都有2次离心...
所以我觉得问题不在这...
可是我还是想问rek或有其它大大...
针对转好的cDNA要如何做补救??
※ 引述《lakerjackt (NN )》之铭言:
: 这我知道阿...但酒精真的有影响到我的cDNA...
: 应该连PCR都做不太出来阿!!!
: 其实我是在猜机器或试剂有问题....
: 反正我现在头大了阿!!...
: red大是建议我把cDNA再通一次column..把酒精洗净吗?
: ※ 引述《redhawk ( )》之铭言:
: : 基本上,的确是PCR做的出来的,q-PCR也应该要看到结果
: : cDNA的纯度真的很重要, 不只是在转cDNA的过程
: : 先前准备RNA的步骤也有很大的影响
: : 尤其是处理酒精的步骤, 不够乾净俐落的话, 是会影响深远的^^"
: : 另外, 不知道你转cDNA是用OligodT或是random hexmer呢?
: : 这个对你要看的是什麽基因也会有影响
: : 不过目前我觉得酒精去除的不够乾净应该是主要原因之一
: : 你可能需要重新Isolate一次会比较好
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