作者puec ()
看板Biotech
标题Re: [求救] 抽pasmid的量都好少
时间Sat Dec 16 17:04:03 2006
: 那减少养菌时间,那到底要多久呢?其实我养到後面要做实验的时候,都已经可以看到一
: 些丝状的悬浮物跟沉淀在下面,那样好像就是细菌死掉了?
养了24小时不如就不要做。另外你的转速也太低了,一般是150~300rpm都可以,端看
你的shaker的回转半径。是不是要问"如何根据shaker的回转半径决定转速?"...其实只要
你的菌液不会洒出来就好了。shaker是为了要增加溶氧量,只要不会洒出来,基本上是越
快越好。
这样看来你好像是没有上过微生物实验课的样子喔。你可以做个实验,收集培养不同时
间的菌液以後测od值,你会发现菌一开始增加的速度很慢,然後会突然增加,之後会
开始减少。所以不是说养越久菌越多DNA就越多,你的情形是,你抽的菌都是属於最末期
那些很不健康快死快死的菌。
至於如何决定要养多久?这就是凭经验了,但是对新手而言,去测个OD是不错的方法。
OD=4应该差不多,做久了以後用肉眼看就可以抓到大概多少浓度的菌液可以抽出品质较
好的DNA了。
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◆ From: 220.130.218.41
1F:推 turtle24:OD=0.4 到4就爆炸了~~XD 12/16 18:31
2F:→ puec:0.4太稀,4如果太多,1~2应该可以吧。其实我也没测过啦~ 12/16 18:33