作者hychou (布丁)
看板Biotech
标题[问题] Relative Q-PCR
时间Mon Dec 25 10:44:13 2006
板上前辈们好:
最近因为要同时进行6个基因的mRNA定量
使用real-time PCR, 虽然做相对定量
但仍使用细胞株A562的cDNA做为standard
想请问有standard的情形下,
是否reference gene (GAPDH)与target gene可以在不同run进行?
并且每个target gene都可以用同一盘GAPDH的结果去normalize?
另外,如果target gene为low copy number
是不是可以先行跑5个循环左右
再把这些PCR product做real-time PCR
如果我的概念有问题,还请前辈们指正.
感激不尽 ^^
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.29.223.22
※ 编辑: hychou 来自: 163.29.223.22 (12/25 10:45)
1F：推 qqo8855436:target 跟 internal可以在不同run跑 12/29 22:22
2F：→ qqo8855436:我的经验....low copy不至於会[侦测不到 所以不需先跑 12/29 22:23
3F：→ qqo8855436:要用同一管的cDNA去跑TARGET跟internal (以上参考) 12/29 22:24