作者aggaci (学钢琴，左手怎麽那麽笨)
看板Biotech
标题Re: [问题] 请问PCR Full-length cDNA ?
时间Thu Dec 28 21:17:10 2006
※ 引述《mandible》之铭言：
: PCR很多次了
: 还是P不出来
: 感觉primer dimer很明显?
: 请问高手有哪些方法?可以教导我!!
: 我的条件是
: 94度C-1mins
: 45度C-2mins
: 72度C-3mins
: 跑36 cycles
: pcr product大概是784bp(我知道很短)但是就是跑不出来!
: 用的是taq proofreading enzyme (因为要送去定序)
: 大概是这样!x
94度 30s
60度 30s
72度 1min
若GC content > 50% 要加betaine or DMSO
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.100.165
1F：推 mandible:DMSO我也加了!!谢谢~~ 12/28 22:05
2F：推 mandible:我查过了..我的Sense Tm值61度.antisense59度c 12/28 22:08