作者nation (^^)
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标题Re: [问题] 测Cell cycle的结果
时间Sat Jan 6 03:46:04 2007
bcl-2有down-regulation, P53没变化不能推论是bcl-2的变话引发apoptosis
除非overexpress bcl-2可以rescue绝大多数的细胞,使之在药物作用下
不会再发生apoptosis的话,
才能宣称apoptosis是因为药物down-regulate bcl-2而发生
flow cytometry的结果利用ModFitLT来分析的话
是可以大略判断有没有apoptosis
但是不是看G2/M的peak有没有改变
是看没有整套DNA(dipoid)的部分
不过没有办法完全量化apoptosis的程度
称为assessing apoptosis by detection of sub-diploid population
要判断apoptosis的程度
应该用标准的几种方法:
1)Annexin V binding
2)caspase 3 activity assay
3)TUNEL assay
此外,影响Bcl-2, 不代表不会影响Bax, Bim, Bak, Bcl-XL
Apoptosis不是Bcl-2一个分子决定
往往是看各分子间的比例和平衡
因此必需用overexpression/knockdown来验证假设
※ 引述《tirecake (三跪九扣三跪九叩)》之铭言：
我现在在念一篇paper
里面有做到分析cell cycle 用PI染DNA
跑Flow 会看到 G0/G1 S G2/M的peak
我以前学过tumor cell会有非整数倍体出现
所以G2/M和G0/G1的比值不会接近二
但PAPER上用药物处理的细胞 他的G2/M peak比没有加药的control组高一倍
推论为发生apoptosis 走bcl-2的路径
这是什麽道理呢?
烦请先进教导 谢谢!
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Digest those memories of him from my heart with trypsin,
and store in LN2 bottle forever.
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◆ From: 61.62.195.21
1F：推 borhen:cell cycle无法判断他死亡的路径= =只能跟你说细胞的状态 01/05 23:38
2F：→ borhen:必须搭配其他结果才能判断 01/05 23:39
3F：推 tirecake:忘了说 Bcl2是作者用western测出的 01/05 23:43
4F：推 tirecake:western做bcl2有"down-regulation" p53没变化 01/05 23:46
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◆ From: 128.135.176.169
※ 编辑: nation 来自: 128.135.176.169 (01/06 03:46)