作者iceoo (醉心於巴黎)
看板Biotech
标题[问题] 关於Ni2+ column
时间Wed Jan 10 01:24:08 2007
请问一下 在用imidazole洗纯化之蛋白质的时候
因为用1M imidazole去洗还是得不到我要的蛋白质
(用SDS-PAGE没压到 但pri-bind有压到)
所以就再提高imidazole的浓度 当提高到2M时
在洗的过程中 带有Ni2+的 resin逐渐由绿色转为紫色
请问是为什麽呢 我再用PBS wash後 又恢复成绿色了
thx!
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莫听穿林打叶声，何妨吟啸且徐行。
竹杖芒鞋轻胜马，谁怕？一蓑烟雨任平生。
料峭春风吹酒醒，微冷，山头斜照却相迎。
回首向来萧瑟处，归去，也无风雨也无晴。
~~~《定风波》~~~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 61.230.67.83
1F：推 Bluecold:pH? 01/10 06:49
2F：推 aggaci:没结合上去吧?通column前後，target protein量有改变吗? 01/10 14:19
3F：推 wensing:用到1M imidazole相当高浓度！ 01/10 18:00
4F：→ wensing:我只用300mM就可以洗下来了！ 01/10 18:01
5F：推 alaric:你的cell extracts有表现? 01/10 21:27