作者anchi (请给我胖老鼠~~~)
看板Biotech
标题[问题] 有关cloning的问题
时间Wed Jan 10 12:06:28 2007
我想要clone 人类chromosome上的某个基因,
之後要接到retroviral的vector上,
请问,有办法直接用设计两端primer方式,夹出这个基因吗?
(之前做细菌某基因的clone会用这个方法,不晓得是否可用在人类chromosome上?)
还是,要用取出RNA做RT PCR 方式做出cDNA,再去接vector?
另外,假设预计要用的vector是pSIR,
若我想把上面的promoter换成另一个,要怎麽换?
可以直接用restriction enzyme切下原本promoter区域,
然後ligase欲换的promoter上去吗?
这样,是不是还要确认nucleotide base数目是否有shift?
第一次做这方面,请问大家,
我这样的实验设计对不对,有没有错误需要修改或需要注意的事项?
谢谢~
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