作者linzhengzhan (研究所:硕士班vs博士班)
看板Biotech
标题Re: [问题] 请问pull down assay跟CO-IP的差别...
时间Thu Jan 11 22:33:06 2007
※ 引述《sezko (一般大学比较适合我)》之铭言:
: 请问一下这两种方式的差别是什麽呢..??
: 是不是因为pull down assay并不是使用抗体所以才另外取一个名字的阿..??
: 两者不都是观察protein的interaction状况吗..??
: 还有pull down的专一性是否没有CO-IP高呢..??
: 谢谢解答阿....拜托拜托.......
co-ip是用antibody与antigen的特异性来操作protein interaction的实验,事实上
antibody的性质好坏与否,会决定实验的品质与,甚至成败……
-A protein Ab.-A protein-B protein
^^^^^^^^^^^^ ^^^^^^^^^
成败的关键↑ ↑有兴趣的protein
而pull down assay是将已知的protein做成fusion protein (ex.GST),利用enzyme-
substract的specificity来将已知的protein抓着固定,之後再与其他protein
interaction,所以严格说不会有上述的问题……
ex.
Glutathione-GST-A protein-B protein
^^^^^^^^^^^ ^^^^^^^^^^^^^^ ^^^^^^^^^
↑Matrix ↑fusion protein ↑有兴趣的protein
所以你要说这两个方法那一个比较好,见人见智;因为这两个方法都是Paper中,公认的
方法……
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