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标 题Re: [问题] Transformation使用电穿孔的方法
发信站交大生科劲公园 (Fri Jan 12 14:04:28 2007)
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※ 引述《[email protected] (绿tii)》之铭言:
: 各位好~~~
: 我现在在进行一个实验
: 需要使用电穿孔的方式 将ligation product送到 E.coli 中
: 可是我在进行电穿孔的时候
: 常常都会有Arc的情况发生(ms 0.01s)
: 请问为什麽会这样呢 ?
: 我的ligation product totol 是10ul
: 我取 2ul去 transform
: cuvette表面有擦乾才进行transform的
: 真的很苦恼 @@
您好
关於您的情况
始能是competent cell的wash 没有做好
培养E.coli的培养基都是高离子浓度的
如果competent cell由表面就可以看到成淡黄色
或是 离新後大部分都是溶液 菌量很少
(这是不利的 电穿孔的菌可以尽量的浓点)
都有可能导致电阻质太低
一电就爆了
如果实验室有学长姐可以跟他们借 他们做的试试看会不会爆
祝您实验成功
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我们将不会停止探索,
而探索的终点,
必将回到我们的起点,
穿过陌生而猛然意起的那扇门,
我们将第一次认识这地方,
这才发现世间仍待探索的最後一寸土地,
竟是我们当初的起点.
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※Post by snark from snark.Dorm8.NCTU.edu.tw