作者melodyrabbit (melody)
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标题Re: [问题] 请问pull down assay跟CO-IP的差别...
时间Sun Jan 14 23:04:36 2007
※ 引述《sezko (一般大学比较适合我)》之铭言:
: 请问一下这两种方式的差别是什麽呢..??
: 是不是因为pull down assay并不是使用抗体所以才另外取一个名字的阿..??
: 两者不都是观察protein的interaction状况吗..??
: 还有pull down的专一性是否没有CO-IP高呢..??
: 谢谢解答阿....拜托拜托.......
pull down 是把两个protein在in vitro 时丢在一起
只要两个protein有interaction 就可以抓在一起罗
测的是它们有没有 "direct interaction"
不过跟生物体内的情况就有差啦
譬如说,若X与Y protein 是透过Z作桥梁
在pull dowm时就测不出来了
然而相反的,也许两个protein虽然有direct interaction
但是其实在生物体内根本遇不到
也不能说它们有interaction
这时就要用其它方法去看了(例如看它们的co-localization)
Co-IP则是把protein利用trasfection的方法
送进生物体内去co-overexpression
(若是只送入其一,去抓内生性的另一个protein,就不是"co"了)
基本上是算in vivo的实验,不过是overexprression的
所以也可能不是百分之百与体内相同
专一性问题?请别的大大帮忙回答罗!
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※ 编辑: melodyrabbit 来自: 59.121.123.44 (01/14 23:08)
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