※ 引述《milkpa (风中狂歌的傻子)》之铭言： : ※ 引述《zeratul1396 (萨加利亚)》之铭言： : : 小弟因为一些实验上的需求, : : 必须在DNA上标定biotin : : 但是市售的biotin label 的DNA 都很贵,而且太短 : : 请问大家都是如何在DNA上 label biotin的?? : 有kit : 但是一组大约也是要一万多 : 如果需要量比较大还是label到primer再PCR比较好 不会啦 roche 比较贵 ambion 就便宜多了 价钱大概是roche 一半吧 印象中 labeling kit 好像只要 4xxx 元 for 25 rxn (不太记得是几个 rxn) 不过省一点通常可以用超过 25 rxn 可以找紫外光问一下 biotin 满多家的，不限roche有出 biotin 的话除了 pcr labeling 以外 还可以用 chemical link 方式，不过个人觉得 sensitivity 有差 pcr 的当然是强很多 如果真的想要省钱的话，可以买terminal transferase + biotin-dUTP (之类的，年代久远不复记忆) 自己看一下 3'-terminal biotinylation 的方法 其实也满简单的，就是把东西加一加丢 37度水浴槽之後再纯化就可以了 不过我之前试过 efficiency 真的差很多就是了 除非量多到爆点的程度 否则还是乖乖的用 pcr labeling kit 吧... PS 以前试过用普通的 taq 做 dig-labeling，结果是ok 的，不过效率非常差... 但是还是有 signal喔 --

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