作者tirecake (三跪九扣三跪九叩)
看板Biotech
标题[问题] 我养的huvec有怪点点
时间Mon Jan 29 15:51:52 2007
http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306505&p=0
正常
http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306506&p=1
养的代数多了就会开始有点点
那些点点是什麽啊
一开始是一群一群数十颗
过四五天就会很多 但medium却没有什麽变化
原本这细胞的代谢物就很多 但这些点点是贴盘的
多到一种程度会整片漂起来 开始影响细胞生长
我的细胞是primary culture 现在约八代 长得超慢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 203.64.247.100
1F：推 enisx:细菌污染?? 01/29 16:06
2F：推 enisx:还是血清的沉淀物...(有请其他高手解答吧 -_-) 01/29 16:10
3F：推 ilyz25:HUVECs不是只用三到七代吗? 会不会是养太多代...我们家只用 01/29 17:00
4F：→ ilyz25:只用到第三代...还有我的 dish有额外 coating gelatin! 01/29 17:02
5F：推 tirecake:我想请问细菌是不是会有布朗运动 因为点点是贴盘不动的 01/29 19:55
6F：→ tirecake:且这些点点不太会"爆发",我一周SUBCULTURE一次 01/29 19:56
7F：推 iiidns:感觉类似细胞死掉以後的碎片 我的细胞也曾经这样过 ~.~ 01/29 22:03
8F：推 sakuru:细菌污染，我之前就是这样子 01/29 23:29
9F：→ sakuru:或是霉菌，你的medium应该会很快变黄吧?! 01/29 23:30
10F：推 sakuru:而且你的细胞不太纯的样子耶，细胞浓度也太低了，会长不好 01/29 23:33
11F：推 apa9394:fibroblast SUBCULTURE 最好打成１颗颗的聚集成一片 01/30 00:43
12F：→ apa9394:一开始就有一小片的话有些其实已经不是monolayer... 01/30 00:45
13F：→ apa9394:那团非"monolayer"会整团漂起来．．． 01/30 00:46
14F：→ apa9394:trypsin作用完後离心去除trypsin-medium mix後 01/30 00:47
15F：→ apa9394:加入fresh new medium 打散细胞後静置１分钟让非单颗的 01/30 00:48
16F：→ apa9394:细胞沉下去 吸取suspension seeding 留下下面约3-5ml丢弃 01/30 00:49
17F：→ apa9394:3-5小时後看细胞贴附的状况有无细胞碎片决定要不要换 01/30 00:51
18F：→ apa9394:medium...要污染３小时就够了．．． 01/30 00:53
19F：→ apa9394:BTW那些小点点 小弟觉得是污染...但是跟第一张的小黑点 01/30 00:55
20F：→ apa9394:无关...因为第一张看起来像血清的沉淀物or apoptotic body 01/30 00:56
21F：→ apa9394:但第２张是我常看到的污染...而且是跟动物有关的... 01/30 00:57
22F：→ apa9394:因为小弟实验室也是in vitro+in vivo... 01/30 00:57
23F：→ apa9394:个人经验仅供参考...但是有用的话麻烦跟小弟说一声 01/30 00:58
24F：→ apa9394:因为最近也是被新来的弄得很烦..new comer=contamination? 01/30 00:59