作者tirecake (三跪九扣三跪九叩)
看板Biotech
标题Re: [问题] 我养的huvec有怪点点
时间Tue Jan 30 09:19:38 2007
引述《tirecake (三跪九扣三跪九叩)》之铭言：
: http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306505&p=0
: 正常
: http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306506&p=1
: 养的代数多了就会开始有点点
: 那些点点是什麽啊
: 一开始是一群一群数十颗
: 过四五天就会很多 但medium却没有什麽变化
: 原本这细胞的代谢物就很多 但这些点点是贴盘的
: 多到一种程度会整片漂起来 开始影响细胞生长
: 我的细胞是primary culture 现在约八代 长得超慢
推 sakuru:细菌污染，我之前就是这样子
→ sakuru:或是霉菌，你的medium应该会很快变黄吧?!
推 sakuru:而且你的细胞不太纯的样子耶，细胞浓度也太低了，会长不好
就是因为medium不太有变化 所以我才困惑
我看过污染到medium变色 里头有沙沙的混浊物 但跟我现在情形不同
细胞不太纯?会不会是我的细胞变性了?(变成fibroblast) 因为这阵子我只养一种
浓度低是因为1.老代数了细胞变很大 2.点点的影响
推 apa9394:fibroblast SUBCULTURE 最好打成１颗颗的聚集成一片
→ apa9394:一开始就有一小片的话有些其实已经不是monolayer...
→ apa9394:那团非"monolayer"会整团漂起来．．．
我整片漂起来的不是细胞 是那些点点
而霉浆菌污染应该不容易看吧(应该比我的点点更小?) 我们是用倒立显微镜PH1看
霉浆菌在专用AGAR上有荷包蛋状Colony
该不会是我之前上食研所的课 带了sample回来污染到了
可是年轻细胞都不会有事 解冻後养三四代都很好 7~8代就开始了
另外我还想问
我的细胞会变大变老 以至於8代以後很难长满
我们老师要我常常subculture这样对吗 一周一次-->一周两次,且不是分盘,是重新seed回
因为每次叫起来再贴下去 就会牺牲掉一些细胞
代数增加很快 盘数却没有增加 不是更快到达细胞的寿命吗
--
驾一叶之扁舟 举袍樽以相属
寄蜉蝣於天地 渺沧海之一粟
哀吾生之须臾 羡长江之无穷
挟飞仙以遨游 抱明月而长终
知不可乎骤得 托遗响於悲风
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 61.62.195.21
1F：推 apa9394:前面污染的问题我没看到无法解释... 01/30 09:44
2F：→ apa9394:後面subculture的思考方式我觉得要考虑至少要多少能长... 01/30 09:45
3F：推 ceci:我觉得有点像死细胞碎片 01/30 09:54
4F：推 apa9394:我也是觉得是细胞碎片... 01/30 12:40
5F：推 dlink:依我养huvec的经验,我觉得像是污染。 而至於subculture的 01/30 19:45
6F：→ dlink:问题, 一般实验室使用huvec大约都只用到第五代 01/30 19:46
7F：→ dlink:，除非有特殊目的。所以你要不要先跟你们老师讨论一下代数 01/30 19:46
8F：→ dlink:的问题呢？ 确定一下他是不是另有目的... ^^ 01/30 19:47
9F：推 sakuru:你把细胞trypsin下来又种回去的目的在哪 ?? 01/30 21:58
10F：推 tirecake:我们老师说这样比较不会老 01/30 23:45
11F：→ tirecake:但我觉得这样的说法怪怪的 01/30 23:45