※ 引述《blankmind (pain)》之铭言： : 上次换了一组kit後我的plasmid终於在gel看的到了 : 不过一用restriction enzyme切完後 : 跑出来的gel啥东西都没有 : (隐约可看到没切的plasmid) : 请问水的影响会很大吗?? : (因为实验室的pack很久没换了...灯一直闪呀闪的...) : 还有我必须要用两个enzyme去切 : 请问大家不同厂牌的enzyme他的buffer可以共用吗? : 我的enzyme是 BamHI (New England Biolab) : XhoI (Promega) : 两个都各有自己原厂附的buffer : 条件是1μl plasmid : 0.5μl enzyme(BamHI XhoI) : ddH2O 6.8μl : 10X BamHI buffer 1μl : 0.2μl BSA : 共10μl : 可以同时放下去切吗? : 我切一个半小时会不会不够久... : 麻烦大家帮我解答一下 : 谢谢大家!!!! 可以去查一下catalog...看bfr.的组成 我试过EcoRI(NEB)/XhoI(promega)没有什麽差... 或许EcoRI本身就很强了...所以没影响... 水可能有影响（DNase）...到别的地方装一些水回来阿...很好解决的问题 你也可以跟其他实验室借enzyme.来作control 然後DNA下多一点去切阿...用1ug的量...不信会看不到..... 如果没那麽多....就多抽几管mini...或是抽个midi...maxi的 你上列的条件跟我差不多...我只是100x BSA 用0.5ul（因为懒得稀释）.. 又怕取不到....所以才加0.5.....只要够量...那没有什麽差别.... 至於会切就是会切.....一个半小时够了....顶多是切不完全 不放心...就放个三小时...总比你跑完胶...看不到...再重作一次还省时..... 建议你...要试...就一次试.....这样省很多时间 --

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