我也觉得是污染 我有一次类似的经验,也是第5代的时候 (其实我怀疑是霉浆菌,但是我不敢确定) medium一切都很正常,但是就是有小点点在里面 我用抗生素杀过的隔天现象有改善 但是在放一天小点点又出现了 最後我就丢了 重新解冻新的..用的配方也都一样.. 小心一点之後这个现象就没有出现过了 这细胞已经长的很慢了,让他从一点点开始长到满实在很为难他 另外我建议你两天就要换一次medium subculture的量要控制在第四天是8分满的状态下 4~5天做一次继代培养 真的不能超过第8代,细胞都会变形 这样他就会长的很健康了!!! ※ 引述《tirecake (三跪九扣三跪九叩)》之铭言： : 引述《tirecake (三跪九扣三跪九叩)》之铭言： : : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306505&p=0 : : 正常 : : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306506&p=1 : : 养的代数多了就会开始有点点 : : 那些点点是什麽啊 : : 一开始是一群一群数十颗 : : 过四五天就会很多 但medium却没有什麽变化 : : 原本这细胞的代谢物就很多　但这些点点是贴盘的 : : 多到一种程度会整片漂起来 开始影响细胞生长 : : 我的细胞是primary culture　现在约八代　长得超慢 : 推 sakuru:细菌污染，我之前就是这样子 : → sakuru:或是霉菌，你的medium应该会很快变黄吧?! : 推 sakuru:而且你的细胞不太纯的样子耶，细胞浓度也太低了，会长不好 : 就是因为medium不太有变化 所以我才困惑 : 我看过污染到medium变色 里头有沙沙的混浊物 但跟我现在情形不同 : 细胞不太纯?会不会是我的细胞变性了?(变成fibroblast) 因为这阵子我只养一种 : 浓度低是因为1.老代数了细胞变很大 2.点点的影响 : 推 apa9394:fibroblast　SUBCULTURE　最好打成１颗颗的聚集成一片 : → apa9394:一开始就有一小片的话有些其实已经不是monolayer... : → apa9394:那团非"monolayer"会整团漂起来．．． : 我整片漂起来的不是细胞 是那些点点 : 而霉浆菌污染应该不容易看吧(应该比我的点点更小?) 我们是用倒立显微镜PH1看 : 霉浆菌在专用AGAR上有荷包蛋状Colony : 该不会是我之前上食研所的课 带了sample回来污染到了 : 可是年轻细胞都不会有事 解冻後养三四代都很好 7~8代就开始了 : 另外我还想问 : 我的细胞会变大变老 以至於8代以後很难长满 : 我们老师要我常常subculture这样对吗 一周一次-->一周两次,且不是分盘,是重新seed回 : 因为每次叫起来再贴下去 就会牺牲掉一些细胞 : 代数增加很快 盘数却没有增加 不是更快到达细胞的寿命吗 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 61.228.179.34