※ 引述《yussing (蓝色天空)》之铭言： : ※ 引述《tirecake (三跪九扣三跪九叩)》之铭言： : : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306505&p=0 : : 正常 : : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306506&p=1 : : 养的代数多了就会开始有点点 : : 那些点点是什麽啊 : : 一开始是一群一群数十颗 : : 过四五天就会很多 但medium却没有什麽变化 : : 原本这细胞的代谢物就很多　但这些点点是贴盘的 : : 多到一种程度会整片漂起来 开始影响细胞生长 : : 我的细胞是primary culture　现在约八代　长得超慢 看起来的确像是细菌污染没错 不过有放大倍率更大的图吗? 仔细看的话,细菌污染在细胞外会有颤动的小黑点 如果是真菌污染,大部分比较多yeast污染 看起来在细胞外会有比细胞小的许多小圆球聚集成团 据说霉浆菌污染比较难辨别,因为霉浆菌又比一般细菌还小 : 我也是culture的新手 : 最近常爆发的污染也是像你图内的样子 : 一开始以为是霉菌,(听说霉菌初期感染也是黑黑一团,像Totoro里面那个小黑虫@@) : 後来有个学长跟我说是细菌感染... : 结果我今天有一盘也是爆发了, : 就是细胞都贴在底下,但是在细胞上方飘了一大片雾黑黑的点点 : 後来我用10x的镜头盯着看,发现其实整团里面都在扭动!!! : 所以是细菌啦 : 我还有爆发另一种细菌 : 我的细胞贴在底部,然後在细胞的旁边会有黑点点,然後就在细胞旁边一直小打转, : 不然就是黑点点一直会轻微的一直去撞我的细胞 T^T : 其实就是细菌啦 : 因为学长说 就算是细胞的废弃物..也不会这麽多(一个overnight就变这样) : 请问,是什麽细菌很重要嘛?? : 如果是霉浆菌....有代表什麽意思嘛??? 知道是哪种细菌,有相对应的方法解决 如果这盘细胞真的很重要 事情就不是重养那麽简单了 能的话,会希望能够将污染情况降低(完全去除是不可能的) 然後才能做实验 但如果这盘细胞不是太重要,绝大多数都直接重养吧 : 对了,还有个问题,就是每次passage要换到新的plate嘛?? : 因为我些同事说用trpsin收下来 要再passage就换个新的plate长 : 可是有些就说重复使用同一个plate就可以了...可以请问有什麽差异嘛??? : 我的污染这阵子也是很严重 Orz 不懂,重复使用同一个plate的意思是? trypsin收下来之後再种回去? plate中还是无法避免有trypsin残留吧(用buffer洗掉?) 通常trypsin如果存在太久,对细胞有杀伤力 更不用说细胞贴不上去了 另外,如果plate中的细胞没有全部被洗下 那把细胞种回去,plate内就有不同代数的细胞了 无论如何,我觉得还是不要重复使用同一个plate好 纯属个人感想 --

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