作者JeffreyS (念)
看板Biotech
标题Re: [问题] 我养的huvec有怪点点
时间Wed Jan 31 14:16:27 2007
※ 引述《tirecake (三跪九扣三跪九叩)》之铭言:
: ※ 引述《isotoper (想必是酸酸甜甜的吧)》之铭言:
: : 看起来的确像是细菌污染没错
: : 不过有放大倍率更大的图吗?
: 我有照过 但200X就看不到点点呈黑色了 看起来微凸黏在DISH
: 不会动!!!!!!!!
: http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306503&p=1
: 黑点点放大照
: http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306502&p=0
: 健康照
: http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306506&p=4
: 较低倍照
: http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306535&p=33
: 黑点点放大+细胞
: : 仔细看的话,细菌污染在细胞外会有颤动的小黑点
: : 如果是真菌污染,大部分比较多yeast污染
: : 看起来在细胞外会有比细胞小的许多小圆球聚集成团
: : 据说霉浆菌污染比较难辨别,因为霉浆菌又比一般细菌还小
: 我也觉得霉浆菌不会大到我用100X就看得到
是否是霉浆菌污染 可以用PCR check
有市售的kit
还满容易使用的~~ ^^
也可以用一般做免疫萤光染色的方法
将细胞种在玻片上 固定 穿孔
不过不用加一抗二抗 只要染DNA (如hochest 33258)
再用油镜看有没有大量的蓝色小点
(不过这个方法 可以看到时 代表已经污染的非常严重了XD)
: yeast好像会让medium看起来沙沙的
: 但我的medium其实没有变酸
细菌偏酸
yeast污染 medium是会变成粉红色(偏硷)雾状
高倍数可以看到出芽(这是yeast污染最明显的特徵~)
: 我还上网找过污染的图 不过都没看过这种情形
: 说是代谢物 或是细胞碎片应该也没有像黑点点这麽规则 这麽多
: 我的不会o/n就爆发 要4~5天不换medium才会肉眼看见半透明的雾状片漂浮
: 那些片 是整片移动 点点不会自转也不会震动~~
整片飘起来 应该是死掉的细胞吧:p
用高倍看看吧~^^
(边边毛毛的有菌丝 那就是真菌啦!!)
: : 知道是哪种细菌,有相对应的方法解决
: : 如果这盘细胞真的很重要
: : 事情就不是重养那麽简单了
: : 能的话,会希望能够将污染情况降低(完全去除是不可能的)
: : 然後才能做实验
: : 但如果这盘细胞不是太重要,绝大多数都直接重养吧
: 我都有加P/S!
: MEDIUM跟SUPPORT都是厂商买一组两罐 很好配
硕士班时的实验室也有养huvec
我们也有遇过类似的情形>"<
那时问老板也问不出所以然
後来是只要遇到这种情形 那批细胞丢掉
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 210.58.169.35
※ 编辑: JeffreyS 来自: 210.58.169.35 (01/31 16:37)
※ 编辑: JeffreyS 来自: 210.58.169.35 (01/31 16:41)