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在操作的过程中造成的污染不可能和你 PCR 产物一样多吧! 应该是 PCR product 本身的问题 至於一开始没看到可能是 loading 的量太多,两条 band 就黏在一块儿了吧! 如果是要做 gel extraction 的 建议用 low voltage 来分离 (我的 power supply 只能调 50V/100V,所以我只能选50 如果你的能调,可以用更低一些) 然後要用适合你 PCR size 的 gel percentage 喔! 如果还是分不好,就先做 TA cloning 吧! ※ 引述《shamtg (shan)》之铭言: : 请问各位有经验的人士们 : 进行 cDNA 电泳胶体纯化後 : ?什麽反而会有两条 band : 我的步骤如下 : 1.病毒中先萃取出的 RNA : 2.进行 RT-PCR : 3.进行跑胶 : 结果我跑出来的胶有一条 major band 和 一条 primer dimer band : 所以我又进行了以下 (因为要送定序,所以我不希望有 primer dimer band) : 1.跑电泳胶 : 2.将电泳 : 3.胶进行照胶 : 4.将 major band 进行切胶 : 5.将切下来的 major band 进行 纯化 : 6.进行跑胶 : 跑出来的结果发现 在 major band 上方约 0.1 cm 竟然还有一条 band : 这是发生什麽事了呢? : 是切胶的过程出了问题 : or : 胶体纯化出了问题 : 拜托各位了 !! --



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