作者shuyanc (赶快做出来吧!)
看板Biotech
标题Re: [问题] DNA电泳胶体纯化
时间Wed Jan 31 23:04:42 2007
在操作的过程中造成的污染不可能和你 PCR 产物一样多吧!
应该是 PCR product 本身的问题
至於一开始没看到可能是 loading 的量太多,两条 band 就黏在一块儿了吧!
如果是要做 gel extraction 的
建议用 low voltage 来分离
(我的 power supply 只能调 50V/100V,所以我只能选50
如果你的能调,可以用更低一些)
然後要用适合你 PCR size 的 gel percentage 喔!
如果还是分不好,就先做 TA cloning 吧!
※ 引述《shamtg (shan)》之铭言:
: 请问各位有经验的人士们
: 进行 cDNA 电泳胶体纯化後
: ?什麽反而会有两条 band
: 我的步骤如下
: 1.病毒中先萃取出的 RNA
: 2.进行 RT-PCR
: 3.进行跑胶
: 结果我跑出来的胶有一条 major band 和 一条 primer dimer band
: 所以我又进行了以下 (因为要送定序,所以我不希望有 primer dimer band)
: 1.跑电泳胶
: 2.将电泳
: 3.胶进行照胶
: 4.将 major band 进行切胶
: 5.将切下来的 major band 进行 纯化
: 6.进行跑胶
: 跑出来的结果发现 在 major band 上方约 0.1 cm 竟然还有一条 band
: 这是发生什麽事了呢?
: 是切胶的过程出了问题
: or
: 胶体纯化出了问题
: 拜托各位了 !!
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