有些纯化的kit有时会有这样的状况产生（绿盒...淡蓝盒） 像我们实验室大部分都用Vxxgene(便宜)....用起来也ok 但是也有买一组Qxxgene...如果V牌一直有问题....就用Q牌做 还有问题...就是p的不是你要的...到目前都是这样... 我是以时间为前提....建议你其实如果跟平常做的步骤没改变的话（想不出问题所在） 你就两个都送定序...一条才NT$280元...可以解决你的疑惑... 也不用你浪费时间...浪费你的reagent 电压大小好像没有大的差别...他现在是纯化後有两条band... 不是分不开....TA cloning是个不错的选择....我也有用这个很快拿到我要的 ※ 引述《shuyanc (赶快做出来吧！)》之铭言： : 在操作的过程中造成的污染不可能和你 PCR 产物一样多吧！ : 应该是 PCR product 本身的问题 : 至於一开始没看到可能是 loading 的量太多，两条 band 就黏在一块儿了吧！ : 如果是要做 gel extraction 的 : 建议用 low voltage 来分离 : (我的 power supply 只能调 50V/100V，所以我只能选50 : 如果你的能调，可以用更低一些) : 然後要用适合你 PCR size 的 gel percentage 喔！ : 如果还是分不好，就先做 TA cloning 吧！ : ※ 引述《shamtg (shan)》之铭言： : : 请问各位有经验的人士们 : : 进行 cDNA 电泳胶体纯化後 : : ?什麽反而会有两条 band : : 我的步骤如下 : : 1.病毒中先萃取出的 RNA : : 2.进行 RT-PCR : : 3.进行跑胶 : : 结果我跑出来的胶有一条 major band 和 一条 primer dimer band : : 所以我又进行了以下 (因为要送定序,所以我不希望有 primer dimer band) : : 1.跑电泳胶 : : 2.将电泳 : : 3.胶进行照胶 : : 4.将 major band 进行切胶 : : 5.将切下来的 major band 进行 纯化 : : 6.进行跑胶 : : 跑出来的结果发现 在 major band 上方约 0.1 cm 竟然还有一条 band : : 这是发生什麽事了呢? : : 是切胶的过程出了问题 : : or : : 胶体纯化出了问题 : : 拜托各位了 !! --

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