※ 引述《auigoji0720 (auigoji0720)》之铭言： : 上次的那位高手^^ : 我想请问几个问题? : 上次你有跟我说加RA之後的第四天要将细胞dilute後再种回dish, : 你是用trypsin将细胞分离, : 我想问你是怎麽用的, : 因为细胞是悬浮的状态收下後里面含有medium,要如何使用trypsin呢? suspension cell要换medium或者要将agrregation打散 先用离心机离(大概1000rpm 5~10分钟) 离完後将medium轻轻倒掉(不要连细胞一起倒了) 吸PBS再洗细胞 洗个两三次medium乾净了再加trypsin(打散aggregation) 最後就是换medium跟算cell density : 另外,细胞一定要养在36mm的dish上吗? : 因为我必须要养一定的量再收细胞run western,所以必须养在10cm dish : 你种回dish的浓度是依照dish大小分的吗? : 这些是我遇到的问题,谢谢你的帮忙!!^^ 这是最先实验设计时就要想好 你induction都做完了才发现细胞数量不够会来不及 看你要做什麽实验要用多少细胞量 就用什麽dish 每一种dish可以养的细胞量都不太一样 一般说来 36mm的petri dish 可以养大概2x10^6 10cm大概是(1~1.2)x10^7左右 -- 如果孔子是那待沽的玉 我便是待斟的酒 用一生的时间 蕴酿自己的浓度 只为等待刹那的倾注 张晓风 酿酒的理由 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 221.169.50.122 ※ 编辑: boyo 来自: 221.169.50.122 (02/07 18:36)