※ 引述《Adler (Adler)》之铭言： : 我想要将一段只有50初b.p.的tag : 接到一个约5kb的vector上 : 想要请问一下 有没有人做过类似的实验 : 可以告诉我insert与vector间的molar ratio大概是多少 : 我已经试过许多比例了...@@ : 谢谢大家 不用太care比例的问题 总之insert越多越好 我一向都是1微升的vector和7.5微升的insert，再加1微升buffer和o.5微升（酉每）， 好像你们台湾叫酵素，好奇怪的名字，呵呵 等长出克隆之後，多挑一些，放在eppendorf管摇，每个接200微升左右的LB 37度摇3-4小时之後，直接取菌液作为template进行菌液PCR检测。要注意的一点是， 循环数不要超过25个，一般20个左右就足够了，否则很容易出现假阳性。 建议你先挑个10-20个，一般肯定有了。菌液PCR比较方便，但之後还需要将阳性克隆 扩增起来抽质粒（酉每）切鉴定。50bp的切出来会看不到了，你可以选其他（酉每） 切出包含insert，但又比insert大一些的片断，通过与空载体切出的片断大小相比 来判断是不是阳性克隆 --

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