※ 引述《bee (Bee)》之铭言： : 在此也顺便请问一下板上高手们 : 什麽情况下会形成inclusion body? : 我在一本纯化的书中看到culture size会影响 culture size 会影响的原因也很多 但是你可以把你的培养条件设成最佳 那就可以排除他的问题 比方说 培养的体积跟锥瓶的比例 溶氧率的维持 shaker 的转速 温控 有的人刁的话连培养基的 autocleave 　时间也要控制 因为煮太久焦糖化作用把 glucose 　给破坏掉 那也会造成一些奇怪的现象 养大量养小量 不会有表现上的差别 差别是你养大量或小量时 培养条件发生改变 比方说 你用小瓶养大量 空间不够 溶氧的比例较低 细菌长的不好 所以蛋白表现不出来 基本上 你的问题其实没有说清楚一点 你在纯化的时候那一批大量养的菌蛋白是否有表现出来 确认有表现了再去做纯化 我之前有收小量 确认蛋白有表现并且是存於supernatant中 而这次收大量时 的确就没注意到收大量和收小量culture condition间的差异 (没想过溶氧率的问题) 感谢提醒 如果真的是inclusion body 　的问题 再来解决inclusion body 的问题 比如说降温 改变IPTG 　浓度 或是换host 方法很多 等你确认问题 再说 我想主要还是culture的问题 感谢b大的提醒 过年後有把问题解决的话再跟大家分享经验 谢谢 --

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